Анализ ИФА – что это такое: иммуноферментный анализ крови

Что лежит в основе методики

В основе результатов ИФА анализа лежит получение химических реакций на ферменты, служащие особенными опознавательными знаками для распознания антител. Следовательно, во время иммунохимических реакций антитела начинают взаимодействовать с некоторыми антигенами. Всё это даёт основания утверждать, что ложные результаты при сдаче крови на ИФА минимальны.

Анализ крови

Исследование позволяет определить количество иммунных клеток, их свойства, а также наличие необходимых антител

Положительным результат считается тогда, когда обнаруживается окрашивание раствора. Окрас сигнализирует о том, что антигены взаимодействуют с антителом. В случае когда ничего подобного не происходит, результат является отрицательным.

Суть методики

Возможности иммуноферментного анализа поистине обширны. Теперь и представить себе трудно, как можно обойтись без подобных исследований, применяемых буквально во всех отраслях медицины. Кажется, что может сделать ИФА в онкологии?

Оказывается, может. И многое. Способность анализа находить маркеры, свойственные некоторым видам злокачественных  новообразований, лежит в основе раннего выявления опухоли, когда другим способом она еще не определяется из-за своих небольших размеров.

Современная клиническая лабораторная диагностика (КДЛ), кроме онкомаркеров, располагает значительным арсеналом панелей для ИФА и использует их для диагностики различных патологических состояний (инфекционных процессов, гормональных нарушений) и мониторинга фармацевтических лечебных препаратов с целью выявления их влияния на организм больного и, кстати, не только человека.

Таким образом, ИФА, благодаря своей чувствительности и специфичности, по образцу крови, взятому из вены, может определить:

  • Гормональный статус (гормоны щитовидной железы и надпочечников, половые гормоны);
  • Присутствие вирусной и бактериальной инфекции (ВИЧ, гепатиты В и С, хламидиоз, сифилис, уреа- и микоплазмоз, герпетическая и TORCH-инфекции, а также многие другие болезни, вызванные патогенными микроорганизмами);
  • Следы жизнедеятельности микроорганизмов, возбудивших  инфекционный процесс, который благополучно закончился и перешел в стадию  формирования  иммунного ответа на этот возбудитель. Такие следы, то есть, антитела, во многих случаях остаются циркулировать в крови пожизненно, чем защищают человека от повторного заражения.

При всех достоинствах такого способа диагностики стоит понимать, что иммуноферментный анализ крови — не способ нахождения причины болезни пациента, а лишь метод подтверждения предполагаемого лечащим врачом диагноза.

Область применения анализа крови на ИФА довольно широка – на данный момент невозможно и представить, насколько бы усложнились поиски причины множества заболеваний. Такое исследование теперь применяется практически во всех медицинских отраслях, даже в онкологии.

Важно! ИФА – анализ крови, который показывает маркеры, характерные для некоторых злокачественных процессов, что позволяет обнаружить заболевание на том временном этапе, когда никакому другому способу это неподвластно.

В современных диагностических центрах, лабораторные обследования представлены не только онкомаркерами – они снабжены внушительным арсеналом панелей для проведения данной диагностики. С их помощью можно определить множество патологических состояний, таких как гормональные отклонения и инфекционные процессы различного происхождения.

Кроме этого, проведение и расшифровка анализа крови ИФА даст возможность отследить действие медицинских препаратов на организм больного человека и даже животного. Последнее широко применяется в ветеринарных клиниках, помогая сохранить здоровье нашим домашним питомцам либо кормильцам, обеспечивающим стабильное поступление мясной, молочной продукции и незаменимых в рационе яиц.

Так, в результате забора всего нескольких миллилитров венозной крови и ее диагностики методикой ИФА, врач, описав материалы исследования, сможет определить:

  • гормональное состояние, включающее биологически активные вещества половых и щитовидной желез, а также надпочечников;
  • наличие бактериальной и вирусной инфекции (гепатит В и С, сифилис, герпес, хламидиоз, туберкулез, мико- и уреаплазмоз, ВИЧ, TORCH) и другие заболевания данной природы;
  • признаки жизнедеятельности возбудителей патологического процесса, завершившегося выздоровлением и перешедшего в стадию образования антител (иммунного ответа).

Такие комплексы гораздо проще распознаются и ликвидируются клетками иммунитета. Остаточные явления в виде антител во множественных случаях содержатся в крови пожизненно, что практически сводит риски повторного заражения к нулю.

Иммуноферментный анализ крови на паразитов и других микроорганизмов – вредителей здоровью организма дает возможность не только установить наличие возбудителей, но и расскажет об их численности в плазме крови пациента.

Уровень концентрации возбудителя в значительной мере оказывает влияние на развитие инфекции и скорость выздоровления, поэтому качественная оценка считается не менее важной, чем количественная. Ей отводится далеко не последняя роль как при лечении детей, так и взрослых.

Методика исследования строится на нескольких вариантах (прямой и непрямой – конкурентный и неконкурентный) выполнения поставленных задач, причем каждый из них предназначен для определенных целей. Такой подход позволяет производить целенаправленный поиск, и в кратчайшие сроки выявлять причину той или иной патологии.

Для обнаружения Ig разных классовых категорий применяется 96-луночный планшет (полистироловая панель), а в его лунках расположены сорбированные рекомбинантные белки. Они исполняют роль антигенов, и на начальном этапе находятся в твердой фазе.

При попадании в лунку с плазмой крови, антигены или антитела идентифицируют в связи со своей направленностью объект, и формируют комплекс (АГ – АТ). Данное образование закрепляется ферментным соединением (коньюгатом), который впоследствии проявится измененным окрашиванием лунки.

Предлагаем ознакомиться:  Чем лечить герпес таблетки мази профилактика

Данный анализ можно выполнять на вошерах – промывных аппаратах и считывающих спектрофометров, но они требуют ручного труда. Безусловно, лаборанту в несколько раз удобнее и быстрее осуществлять все манипуляции на полностью автоматизированных приборах.

При их использовании сотрудники лаборатории освобождаются от большого объема монотонной деятельности – промывания, закапывания и остальной рутины, но не все лечебные учреждения могут себе позволить такую дорогостоящую аппаратуру

Поэтому многие больницы и диагностические заведения продолжают осуществлять ИФА по старинке – на полуавтоматах.

Интерпретация материалов исследования исключительно компетенция специалиста лабораторной диагностики – только ему могут рассказать результаты о специфике и тонкостях протекания заболевания. При этом врач должен обязательно учесть возможность получения ложноотрицательных или ложноположительных ответов.

Положительные стороны ИФА

Учитывая, что в основе методики лежит способ получения иммунного ответа от человеческого организма, такой метод является непрямым методом диагностики.

Ивлева Мария Николаевна

Плюсы иммуноферментного анализа крови:

  • Наличие разных модификаций анализа.
  • Высокая точность и технологичность.
  • Вероятность получения ошибочного анализа сводится практически к нулю.
  • Применяется для диагностики заболеваний не только у взрослых, но и у детей.
  • Универсальность. Забор анализа позволяет подтвердить наличие заболевания или наоборот опровергнуть опасения.

Расшифровка результатов

Иммуноферментный анализ подходит для выявления всех форм сифилиса, а, кроме этого, применяется в проведении скрининговых исследований. Для проведения анализа используют венозную кровь пациента, взятую натощак.

Учитывая то, что АТ при сифилисе продуцируются в конкретной последовательности, ИФА может легко ответить на вопрос, когда произошло заражение и в какой стадии находится процесс, а расшифровка полученных результатов может быть представлена в следующем виде:

  • IgM указывают на продолжительность инфекционного процесса (могут появляться при обострении хронических воспалительных заболеваний);
  • IgA констатируют, что заражение случилось более месяца назад;
  • IgG свидетельствуют о том, что инфекция находится в самом разгаре или о проведенном недавно лечении, что легко выясняется при сборе анамнеза.

При проведении анализа на сифилис, лунки с отрицательным ответом (и отрицательный контроль) останутся бесцветными, в то время как положительный результат (как и положительный контроль) даст ярко-желтое окрашивание за счет изменения цвета хромогена, добавленного в ходе исследования.

Однако интенсивность окраски не всегда совпадает с контролем, то есть, она может быть немного бледнее или слегка желтоватой. Это сомнительные результаты, которые, как правило, подлежат повторному исследованию с обязательным учетом количественных показателей, полученных на спектрофотометре, но в целом, окраска находится в прямо пропорциональной зависимости от количества иммунных комплексов (связанные между собой АГ и АТ).

После того как мы разобрали аббревиатуру ИФА и что это такое ─ выяснили, стоит перейти к трактовке результатов. Здесь важно понимать, что если анализ проводили качественный, то результат будет лишь положительным или отрицательным.

В случае же если проводится количественный анализ, то здесь определяется вид антител, их количество и стадия активности. В частности при такой диагностике определяют антитела (иммуноглобулины) IgG и IgM, которые формируются в разные периоды прогрессирования инфекции. Самыми распространенными вариантами результатов в этом случае являются:

  • Повышенный IgМ и полное отсутствие IgG. Такая картина свидетельствует о недавнем инфицировании и острой фазе течения патологии.
  • Повышенная активность иммуноглобулинов обоих видов (IgМ и IgG). Говорит о давнем и хроническом протекании инфекционного процесса.
  • Активность IgG и полное отсутствие IgМ. Инфицирование было не менее полугода назад и сейчас вирус пребывает в затяжной хронической стадии.
  • Отсутствие антител IgG и IgA. Результат не определен.
  • Отсутствие антител IgM, IgA и IgG. Свидетельствует об отсутствии иммунитета к определенной инфекции.
  • Активность антител IgG, IgM и IgA говорит об обострении хронического процесса.

Помимо выявления типов антител лаборант в специальной графе бланка указывает и их количество на объем крови. Помните, разобравшись в том, что такое метод ИФА, не трактуйте результаты самостоятельно. Полученные результаты с точностью может интерпретировать только лечащий врач в зависимости от предполагаемого диагноза, выстраиваемого на основании клинической картины у пациента.

Какие заболевания можно выявить с помощью ИФА

Как уже говорилось выше, при помощи анализа можно выявить целый ряд нарушений, характерных для наличия того или другого недуга. Поэтому многие специалисты назначают большинству пациентов именно ИФА.

Название заболевания Описание
Вирусные гепатиты Это распространённые и опасные недуги печени, которые обычно вызваны вирусами.
На сегодняшний день существует пять видов вирусов, которые могут привести к гепатиту. Их обозначают такими латинскими буквами: A, B, C, D, E.
Сифилис Это венерическое заболевание, которое очень легко выявить методом ИФА.
Очень важно обнаружить этот недуг как можно быстрее, чтобы он не сказался негативно на общем состоянии здоровья.
Цитомегаловирусная инфекция Цитомегаловирус является возбудителем заболевания.
Болезнь может передаваться от матери к ребёнку (внутри утробы), воздушно-капельным способом или при половом контакте с носителем. Поэтому обычно анализ крови на ИФА назначают всем будущим мамам.
ВИЧ Вирус иммунодефицита – это то заболевание, которое прогрессирует очень медленно, но, несмотря на это, является крайне опасным.
Причина заключается в том, что вирус постепенно атакует клетки иммунитета, в результате чего организм становится уязвимым к любым, даже к самым незначительным микробам и бактериям.
Хламидии Благодаря иммуноферментному анализу можно не только подтвердить наличие инфекции, но и определить очень точно гормоны, антитела, антигены и многое другое, что позволяет качественно и эффективно провести лечение.
Кроме этого, анализ даёт возможность максимально точно понять, когда произошло заражение и какие негативные последствия были вызваны в организме при наличии хламидий.
Герпес Герпес может передаваться и воздушно-капельным путём, и во время незащищённого полового акта. Этот недуг опасен тем, что негативно сказывается на работе многих систем организма.
Определить вирус можно качественным и количественным способами. Если используется первый метод, тогда удаётся выявить наличие антител, тип вируса, а также возможность существования предшествующих рецидивов. Что касается количественного, то он даёт возможность определить тип антител или, проще говоря, состояние иммунитета против вируса.
Предлагаем ознакомиться:  Нужно ли сдавать анализ на кишечные инфекции

Самый волнительный из иммуноферментных анализов – ИФА на ВИЧ

Анализ на ВИЧ, пожалуй, больше других интересен широкому кругу населения, ведь пока нельзя с уверенностью утверждать, что исчезли многие социальные проблемы (проституция, наркомания и др.). К сожалению, ВИЧ затрагивает не только эти слои человеческого общества, заразиться можно при различных обстоятельствах, не связанных с половой распущенностью или приемом наркотиков.

Но коль возникла необходимость обследования на ВИЧ, то бояться не следует, что все вокруг узнают о посещении такой лаборатории. Сейчас ВИЧ-инфицированные люди защищены законом, а сомневающиеся могут обратиться в анонимные кабинеты, где можно решить проблему, не боясь огласки и осуждения.

ИФА на ВИЧ имеет смысл проводить после полового контакта, переливания крови, других медицинских манипуляций, предполагающих заражение, и по окончании инкубационного периода («серонегативное окно»), но следует учитывать, что этот промежуток времени не является постоянным.

Он может закончиться через 14-30 дней, а может продолжаться до полугода, поэтому средним значением принято считать интервал от 45 до 90 дней. На ВИЧ кровь сдают так же, как и на другие инфекции – из вены на голодный желудок.

Результаты будут готовы в зависимости от накопления материала в лаборатории и ее загруженности (от 2 до 10 дней), хотя чаще всего лаборатории обеспечивают получение ответа в тот же день или на следующий.

ИФА на ВИЧ-инфекцию определяет антитела к двум разновидностям вируса: ВИЧ-1 (более распространенный в России и других странах Европы и Азии) и ВИЧ-2 (встречающийся чаще на территории Западной Африки).

Задачей ИФА ВИЧ является поиск АТ класса G, которые выявляются на всех тест-системах, но в более позднем периоде, и АТ классов А и М, выявляемых на рекомбинантных тест-наборах нового поколения, позволяющих найти антитела на самых ранних стадиях (инкубационный период – «серонегативное окно»). От ИФА можно ожидать следующие варианты ответов:

  1. Первичный положительный результат: кровь подлежит перепроверке на тест-системе такого же типа, но по возможности другой серии и другим человеком (лаборантом);
  2. Повторный ( ) предполагает новый забор крови у пациента с исследованием ее подобно первичному анализу;
  3. Очередной положительный результат подлежит референтному анализу, при котором используются высокоспецифичные тест-наборы (2-3 шт.);
  4. Положительный результат в обеих (или в трех) системах направляется на иммуноблотинг (тот же ИФА, но выполненный в индивидуальном порядке на тест наборах особо высокой специфичности).

Заключение о ВИЧ инфицировании выносится только на основании иммуноблотинга. Проводится беседа с инфицированным в условиях полной конфиденциальности. Разглашение медицинской тайны в России, как, впрочем, и в других странах, подлежит уголовному наказанию.

Как следует готовиться к сдаче анализа

Иммуноферментный анализ крови сдаётся из вены, а не из пальца, как думают некоторые. Дабы данные были верны, следует выполнить ряд несложных правил.

Анализ крови

Проба крови для исследования берется из локтевой вены

А именно:

  • За пару дней до сдачи анализа не поднимать тяжестей и не выполнять тяжёлую физическую работу.
  • За сутки не употреблять алкоголь и не курить (нельзя даже находиться в накуренном помещении).
  • Соблюдать максимальное спокойствие.
  • Сдавать анализы можно не раньше, чем через 10 дней после того, как употреблялись какие-либо лекарственные средства.

Некоторые таблетки могут влиять на результат анализа, поэтому если отменить приём невозможно, об этом следует сказать доктору.

Некоторые специалисты рекомендуют также за пару дней до анализа сесть на лёгкую диету. Речь идёт о воздержании от копчёной, жареной и солёной пищи. Если кровь сдаётся, чтобы выявить наличие гепатита, то нельзя употреблять также цитрусовые в виде фруктов и в виде сока.

Легкая диета

Специалисты рекомендуют за пару дней до анализа сесть на лёгкую диету

В случае когда необходимо выявить нарушение гормонального фона, на общий анализ может повлиять месячный цикл женщин. В этом случае доктор сам назначает дату, когда сдача анализа будет наиболее оптимальной.

Ниже будет представлена таблица, в которой указаны изменения нормального уровня лютеинизирующего полового гормона, исходя из дня менструального цикла.

Данные изменений нормального уровня лютеинизирующего полового гормона в таблице

Кол-во дней Уровень гормона
1-12 день 12-14 мЕд/л
12-14 день 24-150 мЕд/л
С 15 дня до начала нового цикла 2-17 мЕд/л
Предлагаем ознакомиться:  Чем опасен опоясывающий лишай при беременности и как его вылечить

Анализ даёт возможность выявить разные виды антител в организме, которые показывают себя на каждом этапе развития болезни. Когда недуг только дал о себе знать, активно вырабатываются антитела класса IgM. Если их удалось обнаружить, значит, возникло какое-то заболевание.

После выработки IgM начинается производство IgG свидетельствующее о том, что человек либо является носителем инфекции, либо он недавно переболел чем-то инфекционным. Обычно выявить IgG можно после 3-4 недель, отсчитывая от начала развития IgM, но некоторые антитела могут находиться в организме годами.

Есть ещё такой класс антител, как IgA, который свидетельствует о наличии в организме хронической инфекции. При его обнаружении начинается незамедлительное лечение, а после этого ещё раз сдаётся анализ крови ИФА, дабы убедиться, что лечение принесло свои плоды.

Немного иначе ситуация обстоит с детьми в возрасте до полутора лет, в организме которых на первых этапах жизни для обеспечения надёжной защиты от вирусов в большом числе присутствуют антитела IgG. Поэтому при проверке малышей основное внимание уделяют классу IgM.

Ниже представлена таблица, в которой указаны комбинации наличия или отсутствия инфекции.

ИФА находит хламидию, цитомегаловирус и даже паразитов

Важно понимать, что выявление паразитов через анализ крови требует определенной подготовки от пациента. Так, перед сдачей крови необходимо сделать следующее:

  • За сутки до забора биоматериала нужно исключить из рациона жирную пищу, алкоголь и копчености;
  • Кровь на иммуноферментный анализ крови на паразитов и другие инфекции следует сдавать с утра натощак;
  • Перед сдачей крови запрещено курить минимум за 3-4 часа;
  • В день забора крови желательно не нервничать и не прибегать к усиленным физическим нагрузкам.

Соблюдение этих правил позволит избежать ложноположительного результата на антитела к паразитам.

Анализы на хламидии и цитомегаловирус иммуноферментным методом также обрели особую популярность, ввиду того, что позволяют определить время заражения, стадию заболевания и эффективность лечебных мероприятий.

При внедрении хламидии тоже можно наблюдать появление антител различных классов в разных фазах патологического состояния, вызванного инфекционным агентом:

  • IgM могут обнаружиться уже дней через семь после заражения;
  • IgA говорят о том, что инфекция в организме живет уже более месяца;
  • IgG подтверждают диагноз хламидиоза, помогает следить за лечением и определить его действенность. Следует заметить, что антитела класса G остаются и циркулируют в организме независимо от давности болезни, поэтому для правильной расшифровки анализа нужно принимать во внимание референтные значения (нормы), которые, кстати, для каждой КДЛ свои: с учетом марки тест-системы и специфичности реагентов, входящих в набор. Значения нормы вписываются в бланк рядом с результатом ИФА.

Что касается цитомегаловируса (ЦМВ), то здесь несколько иначе: антитела класса М появляются приблизительно через месяц-полтора, то есть, положительным результат (IgM ) становится в фазе первичного инфицирования или при реактивации скрытой инфекции и остается таковым от 4 месяцев до полугода.

Наличие АТ класса G характерно для начала первичной острой инфекции или реинфекции. Анализ констатирует, что вирус имеет место, однако информации, в какой стадии находится инфекционный процесс – не дает.

Между тем, определение нормы  титра IgG тоже вызывает затруднения, так как она целиком зависит от иммунного статуса конкретного человека, который, впрочем, устанавливается выявлением иммуноглобулинов класса G.

Учитывая такое поведение антител, при диагностике ЦМВИ  возникает необходимость в оценке способностей антител класса G взаимодействовать с ЦМВ, чтобы потом «обезвредить» его (авидность АТ). На начальном этапе болезни IgG очень плохо связываются с антигенами вируса (низкая авидность) и лишь потом начинают проявлять активность, стало быть, можно говорить о повышении авидности антител.

Алгоритм ИФА-исследований при подозрении на ЦМВ

Алгоритм ИФА-исследований при подозрении на ЦМВ

Что такое паразиты – вряд ли стоит рассказывать, ведь они преследуют человека, начиная с детского возраста и, в полном смысле слова, отравляют ему жизнь (продукты жизнедеятельности паразитов очень ядовиты).

До появления в клинической лабораторной диагностике иммуноферментного метода найти паразитов было весьма сложно, теперь же, как говорят: «Нет проблем!». А все потому, что есть ИФА, который отыщет паразита, в какой бы форме тот не пребывал (цисты, личинки, яйца или взрослая особь) и в какой бы части человеческого тела не находился.

О достоинствах иммуноферментного анализа можно говорить долго и много, ведь этот метод сумел решить многие диагностические задачи, используя лишь венозную кровь. Не нужно долгих ожиданий, волнений и проблем с забором материала для исследования.

Таблица расшифровок норм анализа крови ИФА на наличие (отсутствие) инфекций

Кол-во дней Уровень гормона
1-12 день 12-14 мЕд/л
12-14 день 24-150 мЕд/л
С 15 дня до начала нового цикла 2-17 мЕд/л
IgM IgG IgA Расшифровка показателей
Иммунитет к инфекции отсутствует
Имеется поствацинальный (специфическая невосприимчивость к инфекционному заболеванию, появляющаяся в результате вакцинации) или постинфекционный иммунитет
-/ -/ Острая инфекция
Обострение хронической инфекции
/- /- Наличие хронической инфекции

Делая выводы, можно сказать, что когда в организме обнаруживаются антитела определённого вида, тогда в таблице рядом со значением стоит знак « ».

Иногда после получения анализа доктор может назначить проведение ещё одного с целью выявление количественного содержания вещества в организме.

Расшифровкой иммуноферментного анализа крови должен заниматься только специалист, который сопоставит полученные результаты с имеющимися симптомами и назначит грамотное лечение.

Ссылка на основную публикацию

Adblock detector